自噬是细胞使用溶酶体降解途径举行自我吞食的历程,是细胞在营养缺乏等压力情形下维持生涯的主要代谢途径。自噬主要分为三类,即巨自噬(Macroautophagy)、微自噬(Microautophagy)、分子朋侪介导的自噬(Chaperone-mediated autophagy)。自噬在肿瘤、神经退行性疾病、心血管疾病等多种疾病中施展主要作用。
自噬爆发的历程如下:
图一 自噬爆发历程
自噬产品先容:
1.自噬筛选系统:GFP-LC3 WT/MT、GFP-LC3-RFP-LC3 MT、Luciferase LC3 WT/Luciferase LC3 MT
图二 自噬筛选系统
2.自噬检测系统:
单荧光LC3病毒:pLenti-CMV-EGFP-LC3-PGK-Puro、pLenti-Ubc-EGFP-3FLAG-LC3、pLenti-EF1a-GFP-LC3-PGK-Puro
双荧光LC3病毒:AdV-mCherry-GFP-LC3(高效熏染)、LV-mCherry-GFP-LC3(稳固表达)、AAV-mCherry-GFP-LC3(在体检测)、Western Blot检测LC3 I/II、p62:提供LC3、p62(抗体检测)
图三 自噬检测系统
3.自噬基因过表达/滋扰慢病毒:
?滋扰慢病毒、3个靶点/基因、滋扰效率70%以上
?过表达慢病毒、真核表达载体ORF克隆、对应检测抗体
图四 自噬基因操作